每一個(gè)實(shí)驗室分析人員都應該熟練掌握并應用HPLC，對于一些常見(jiàn)的故障分析應該做到游刃有余，才能在運行故障的時(shí)候即使解決問(wèn)題，提高工作效率。

以下是HPLC幾個(gè)常見(jiàn)問(wèn)題及對策：

（1）保留時(shí)間發(fā)生漂移：

①度控制不好，解決方法是采用恒溫裝置，保持柱溫恒定；
②流動(dòng)相發(fā)生變化，解決辦法是防止流動(dòng)相發(fā)生蒸發(fā)、反應等；
③柱子未平衡好，需對柱子進(jìn)行更長(cháng)時(shí)間的平衡。

（2）出現拖尾或雙峰：
①篩板堵塞或柱失效，解決辦法是反向沖洗柱子，替換篩板或更換柱子；
②存在干擾峰，解決辦法為使用較長(cháng)的柱子；改換流動(dòng)相或更換選擇性好的柱子；
③可能柱超載，減少進(jìn)樣量。

（3）做HPLC分析時(shí)，柱壓不穩定：
①泵內有空氣，解決的辦法是清除泵內空氣，對溶劑進(jìn)行脫氣處理；
②比例閥失效，更換比例閥即可；
③泵密封墊損壞，更換密封墊即可；
④溶劑中的氣泡，解決的辦法是對溶劑脫氣，必要時(shí)改變脫氣方法；
⑤系統檢漏，找出漏點(diǎn)，密封即可；
⑥梯度洗脫，這時(shí)壓力波動(dòng)是正常的。

（4）基線(xiàn)漂移原因、解決方法
1)原因分析
①柱溫波動(dòng)。（即使是很小的溫度變化都會(huì )引起基線(xiàn)的波動(dòng)。通常影響示差檢測器、電導檢測器、較低靈敏度的紫外檢測器或其它光電類(lèi)檢測器。）
②流動(dòng)相不均勻。（流動(dòng)相條件變化引起的基線(xiàn)漂移大于溫度導致的漂移。）
③流通池被污染或有氣體
④檢測器出口阻塞。（高壓造成流通池窗口破裂，產(chǎn)生噪音基線(xiàn)）
⑤流動(dòng)相配比不當或流速變化
⑥柱平衡慢，特別是流動(dòng)相發(fā)生變化時(shí)
⑦流動(dòng)相污染、變質(zhì)或由低品質(zhì)溶劑配成
⑧樣品中有強保留的物質(zhì)（高K’值）以饅頭峰
樣被洗脫出，從而表現出一個(gè)逐步升高的基線(xiàn)。
⑨使用循環(huán)溶劑，不提倡。未調整檢測器。
⑩檢測器沒(méi)有設定在最大吸收波長(cháng)處。
2)解決方法 
①控制好柱子和流動(dòng)相的溫度，在檢測器之前使用熱交換器
②使用HPLC級的溶劑，高純度的鹽和添加劑。流動(dòng)相在使用前進(jìn)行脫氣，使用中使用在線(xiàn)脫氣或氦氣脫氣。
③用甲醇或其他強極性溶劑沖洗流通池。

④取出阻塞物或更換管子。參考檢測器手冊更換流通池窗。
⑤更改配比或流速。為避免這個(gè)問(wèn)題可定期檢查流動(dòng)相組成及流速。
⑥用中等強度的溶劑進(jìn)行沖洗，更改流動(dòng)相時(shí)，在分析前用10-20倍體積的新流動(dòng)相對柱子進(jìn)行沖洗。使用離子對試劑、緩沖鹽更應注意平衡柱。
⑦檢查流動(dòng)相的組成。使用高品質(zhì)的化學(xué)試劑及HPLC級的溶劑⑧改變分析條件。使用保護柱，如有必要，在進(jìn)樣之間或在分析過(guò)程中，定期用強溶劑沖洗柱子。
⑨重新設定基線(xiàn)。使用新的流動(dòng)相。
⑩將波長(cháng)調整至最大吸收波長(cháng)處。重選檢測波長(cháng)。